1、药品中污染的微生物处于不稳定状态，微生物种类具有不确定性； 2、在药品生产各个环节中, 微生物污染存在着不均匀性； 3、无论是无抑菌性药物还是抑菌性药物都要进行微生物限度检查，特别是污染于抑菌药物中的微生物在一定条件下可以稳定存在一段时间，虽然它们可能受到损伤，但未死亡，如服用至人体内, 当条件适宜时仍可生长繁殖。 4、某些药物在试验条件下呈现抑菌作用并干扰待检菌的检出或计数, 但当服用后受到胃液及肠液的稀释, 抑菌作用减弱或直接静脉注射入血液, 细菌便可复苏并繁殖, 对人体造成危害。封闭式薄膜过滤器 5、任何一种抑菌药物均有一定的抑菌范围，即抗菌谱。相当多的抗细菌药微生物限度检测仪物对真菌毫无作用。对所有菌类均敏感的药物几乎不存在。 6、细菌对抑菌药物有适应性，耐药性致病菌株在临床上屡见不鲜，所以抑菌药物内是可能存在微生物并可对人体健康造成危害的，因此对抑菌性药物也有必要进行微生物限度检查，但抑菌性药物在检查过程中会有明显的抑菌作用，这在很大程度上影响了微生物的检出。 具备这些验证条件，你就可以进行验证试验了 1、验证实验的设施、设备、器具和材料 2、验证试验用的稀释剂( 液) 、冲洗液 3、具抑菌性样品处理方法 培养基稀释法：该法一般适合于抑菌作用不是很强的供试品。 化学试剂中和法 薄膜过滤法该法：常见的检查方法，适合于可滤过的供试品，特别是无菌检查。 离心沉淀法：常用于抑菌活性较强而又无法直接过滤的供试品，特别是不溶于水的固体中药制剂。 

验证步骤：1、根据样品特性，制定检验方法和检验条件； 2、保证验证试验所用的仪器、培养基和试剂等均符合试验要求； 3、按制定的方法进行试验； 4、根据验证结果，判断是否符合验证的标准。若符合，按验证的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，应重新设立验证方案，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。 Tips：验证时，按供试液的制备和细菌、霉菌及酵母菌计数所规定的方法及要求进行。对各试验菌的回收率应逐一进行验证。验证试验至少应进行3次独立的平行试验，并分别计算各试验菌每次试验的回收率。 验证用菌株？？？ 细菌计数验证用菌株：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 霉菌、酵母菌计数验证用菌株：白色念珠菌、黑曲霉 菌株选择原则：代表性、普遍性、低或非致病性，标准菌株（或该药品中常见污染菌） 菌株的要求：不得超过5代、采用适宜的方法保存、加菌量：50-100cfu。 总结 微生物学检查是药品常规安全性检查的重要组成部分，验证工作十分繁琐，对准确检测出药品中微生物的真实含量具有一定的指导意义和实用价值，是药品检测环节不可或缺的步骤。

实验室快速检测是指利用一切可以利用的实验室仪器设备快速定性和定量。理化方法一般在2小时内能够出结果的即可视为快速检测。微生物快速检测与常规检测相比，能够减少1/2或1/3的时间，且有判断性意义的结果即可视为快速检测。酶联免疫法一般能够在3~4小时得出结果，也算是快速检测。实验室的快速检测严格按照标准操作规范开展检验，着重于挖掘现有设备潜力、更新仪器设备以及改变样品前处理的方式，实现快速筛查的目的，故其有别于实验室常规检测。高效的前处理方法是快速分析检测的关键，传统的样品前处理方法有液-液萃取、封闭式薄膜过滤器索氏提取、蒸馏、离心、沉淀分离和离子交换等，这些方法都比较费时、费力而且不易达到自动化操作。近年来，一些新型的样品前处理技术如固相萃取、磁性固相萃取、固相微萃取、聚合物整体柱微萃取等得到了迅速发展，这些前处理技术能够满足快速、高选择性、样品使用量少、试剂消耗少、自动化程度高和环境友好的要求，与气相色谱及其联用、液相色谱及其联用、质谱等实验室仪器相结www.shxile.com合，达到了快速检测食品中农药残留、食品添加剂、兽药残留、重金属等项目的目的。如毛细管电泳仪以其样品处理简单、多组分同时测定、快速、自动化及越来越低的检出限，被广泛应用在食品农药兽药残留、非法添加剂、生物毒素等方面的检测。另外，实验室快速检测仪器—PCR (polymerase chain-reaction，聚合酶链式反应)仪及实时荧光定量PCR仪由于从样品前处理到PCR扩增及得到实验结果24小时内完成，具有简便、快速、敏感性高、特异性强和对标本的纯度要求低的优点，现已被广泛应用于微生物检测等领域。自从1996年美国ABI公司推出了将扩增和检测融为一体的实时荧光定量PCR仪后，很多公司如德国的Eppendorf、瑞士的ROCHE和美国的MJ等都先后推出了款式不同的定量PCR仪。实验室快速检测仪器还有一类是不需要前处理的，如近红外光谱仪、拉曼光谱仪和核磁共振谱仪，由于其无损、快速的特点与优势，仪器制造厂商将其开发为便携式仪器，已经逐渐从实验室走向现场检测。